2025年7月24日,广东省佛山五区卫生健康局通报,佛山全市累计报告基孔肯雅热确诊病例3645例。为应对疫情,佛山市多个区县发布《告全体市民书》,号召公众积极行动,及时清除蚊虫,杀灭成蚊。
相信这几天大家已经从各个途径了解了基孔肯雅热是什么了,那我们我们来说一说如何预防。目前没有针对基孔肯雅热的抗病毒药物,也无疫苗可预防,所以防蚊灭蚊、避免叮咬是防护的关键。基孔肯雅热的潜伏期一般是1至12天,通常是3至7天。所以研发快速、灵敏且特异的早期诊断技术至关重要,唯有实现早发现与早干预,方能有效阻断疾病传播链,将疫情防控在一线,切实维护公众健康。
01 一管法qPCR mix,直接加入引物模板即可
近岸蛋白推出的适用于RNA模板的一步法多重荧光定量qRT-PCR检测试剂盒(目录号:E695)。特殊工艺处理的热启动Taq DNA聚合酶和热稳定逆转录酶,能够在更快速的程序下进行高性能多重扩增。
产品优势
2)高灵敏度:可进行对低浓度样本检出;
3)多重检测:同一反应管中可同时进行4-6个靶标的检测;
4)高耐受性:可适用于血液、唾液等各种复杂样本环境;
5)防污染体系:体系中添加dUTP/UDG防污染系统,降低假阳性。
性能展示
01 稳定性好
使用近岸蛋白E695进行37℃加速实验,以293细胞RNA为模板(100ng,10ng,1ng,100pg)。加速处理后的试剂跟-20℃保存的试剂对比发现,两者的扩增曲线基线平稳,拐点清楚,指数期明显,曲线整体平滑,具有较好的稳定性。

图1 加速稳定性测试
02 耐受性好
在反应体系配制的时候,加入1μl10%全血作为杂质背景验证扩增的耐受性。使用近岸蛋白E695验证常规体系和耐杂体系对模板的扩增。结果发现,常规体系与耐杂体系的扩增曲线高度吻合(30min内阳性样本检出率维持稳定-Ct值偏差≤0.5),且反应体系未出现非特异性扩增条带或假阳性信号,表现出优异的一致性。

图2 常规体系和耐杂体系比较
02 LAMP让检测更简单,让“凶手”现形一线
LAMP技术,以其颠覆性的优势(恒温操作、检测时间快以及对实验室基础设施要求低等优势)在POCT领域脱颖而出,让核酸检测变得更快速、更简便、更经济、更易于在基层和现场部署!
近岸蛋白可提供全系列的LAMP检测试剂。以RNA样本为主的两款检测试剂盒助力分子诊断POCT即时快检产品开发-显色法的2×Indicator RT-LAMP Master Mix with Dye (for-Lyo)(目录号:FLE228),荧光染料法的2×RT-LAMP Kit with Dye(目录号:E220),其中,FLE228试剂盒均不含甘油及其他影响冻干的成分,包含保护剂、赋形剂等试剂,可用于冻干样品的制备。
产品优势
2)扩增速度快:通常在30min内便可得到扩增结果;
3)可冻干:两款产品均可用于制作冻干粉或冻干小球;
性能展示
显色法的2×Indicator RT-LAMP Master Mix with Dye (for-Lyo)(FLE228)
01 优异的反应性能
FLE228为红黄变色反应,在扩增完成后,阳性结果为黄色,阴性结果为红色,通过肉眼观察即可对反应结果进行判读。以SARS-CoV2 ORF1ab基因,灵敏度可达到100fg/Test;NTC没有显示出扩增信号,表明反应体系具有良好的特异性,没有非特异性扩增。

图3 SARS-CoV2 ORF1ab基因检测
02 客户实测
客户使用FLE228的核心酶自研搭建反应体系。经过两次冻干复溶后检测,发现前后阳性检测时间差异不大,25min即可稳定判读结果。

图4 客户实测结果展示
荧光染料法的2×RT-LAMP Kit with Dye(E220)
01 优异的反应性能
分别以SARS-CoV2 ORF1ab基因和N基因为靶标,同时和供应商N的产品一起检测。结果显示SARS-CoV2 N基因,灵敏度均可达到5×102copies/Test;SARS-CoV2 ORF1ab基因,灵敏度均可达到1×103copies/Test;反应时间上E220快于供应商N(阳性Ct值大大提前);同时NTC没有显示出扩增信号,表明反应体系具有良好的特异性,没有非特异性扩增。

图5 SARS-CoV2 ORF1ab/N基因检测
02 客户实测
客户样本为甲流国家参考品及咽拭子真实样本,临床样本投入量大约是5ng。测试结果发现,E220比供应商N、供应商Y的扩增效率要高,和供应商X的起峰时间差不多,但E220的信号值更高。

图6 客户实测结果展示